Ei-Antikörper

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Antikörper aus Hühnereiern

 
Hassl codicillo quarto regularum vittellorum gallinaceorum causa
Untersuchungen über den Nachweis von IgY-Antikörpern gegen Toxoplasma gondii in Eiern experimentell immunisierter Hühner.

Legehennen wurden mit wasserlöslichem Toxoplasma gondii - Trophozoitenantigen immunisiert und die Eier über einen Zeitraum von 40 Tagen gesammelt. Aus den Dottern wurden die IgY-Antikörper isoliert und in einer Gelfiltration von Begleitproteinen abgetrennt. In einem Geldiffusionstest wurden Präzipitationsmuster zwischen Toxoplasma-Antigen und IgY-Antikörpern bzw. IgG-Antikörpern aus Kaninchen ermittelt und miteinander verglichen.<br>Die wesentlichen Vorteile der Herstellung spezifischer IgY-Antikörper liegen im geringeren Arbeitsaufwand Säugetieren. Sie stellen durch den

gegenüber einer Produktion spezifischer IgG-Antikörper in Wegfall der Blutabnahme überdies eine Alternative zum Tierversuch dar. Ein beträchtlicher Nachteil der gegen Toxoplasma gondii gerichteten IgY-Antikörper ist jedoch dadurch gegeben, daß sie mit anderen Antigenen reagieren als die aus Kaninchen gewonnenen IgG-Antikörper. Die Möglichkeiten des Ersatzes konventioneller Antiseren durch IgY-Antikörper für die Toxoplasmose-Serologie müssen daher erst durch weiterführende Untersuchungen geklärt werden.
Hassl codicillo quarto regularum vittellorum gallinaceorum causa
Vergleichende Untersuchungen über die Reinheit und Spezifität von Dotterimmunglobulin Y isoliert aus mit Toxoplasma gondii - Antigen immunisierten Hennen.

Legehennen wurden mit einem löslichen Extrakt aus Toxoplasma gondii - Trophozoiten immunisiert. Drei verschiedene Verfahren wurden angewandt, um aus den Eiern dieser Hennen die Dotter-Immunglobuline (IgY- Antikörper) zu isolieren und zu reinigen. Die Menge an Antikörpern und die Reinheit der Fraktionen wurden mittels Proteingehaltsmessungen, einer Gelfiltration und einer isoelektrischen Fokusierung bestimmt. Die höchste Antikörperreinheit erzielte man durch ein Zweistufen-Verfahren, das eine Polyethylenglycol-Präzipitation

mit einer Alkoholfällung verbindet. Die qualitative Überprüfung der Antikörper erfolgte an Hand eines indirekten Hämagglutinationstests, einer Immundiffusion und einer Immunelektrophorese. Die Spezifität der IgY- Antikörper wurde mit jener von IgG- Antikörpern aus den Seren hyperimmuner Kaninchen verglichen. Dabei zeigte sich, daß IgY- und IgG- Antikörper partiell unterschiedliche Antigenkomponenten präzipirierten; daß also ein Unterschied zwischen der Spezifität von Eidotter- und der von Kaninchenantikörpern bestand, obwohl beide Versuchstierarten mit der gleichen Antigenpräparation immunisiert worden waren.
Hassl codicillo quarto regularum vittellorum gallinaceorum causa
Reinigung von Eidotter-Immunglobulinen. Ein zweistufiges Verfahren aus Hydrophober Interaktionen Chromatografie und Gelfiltration.

Es wurde ein zweistufiges Chromatografieverfahren entwickelt zur Isolierung und Reinigung von Hühner-IgY Antikörper aus dem Eidotter. Die Antikörper wurden vollständig vom Vitellin und den Lipiden durch Hydrophober Interaktionen Chromatografie mit folgender Gelfiltrationen getrennt.

Im Endextrakt wurden beinahe keine restlichen Dotterproteine, keine Immunglobuline, keine Immunglobulinaggregate und keine Antikörperfragmente entdeckt. Ausserdem erbringt das beschriebene Verfahren Antikörper von ungeschmälerter Aktivität. Obwohl die Endmenge etwas geringer ist als jene aus der Isolierungsmethode mit Polyäthylenglykol- und Alkohol - präzipitation, wird das Verfahren besonders empfohlen, wenn hochreine Antikörperpräparationen gebraucht werden.

Antikörper aus Reptilieneiern

 
Hassl codicillo quarto regularum vittellorum gallinaceorum causa
Schlangen Ei Immunglobuline: Biochemische Eigenschaften und eine angepaßte Isolierungsmethode.

Die Übertragung von spezifischen Immunglobuline von den Müttern zu ihrem Nachkommen über das Ei ist ein allgemeines Phänomen in eierlegenden Wirbeltieren, aber das Auftreten dieses Phänomens in Reptilien, insbesondere in colubriden Schlangen, ist bis vor kurzem nicht bewiesen worden. So wurden die wesentlichen biochemischen Eigenschaften der Antikörper, die in den Eiern von Elaphe guttata (Colubridae, Serpentes) deponiert wurden, nach Isolierung des Antikörpers durch Präzipitation und der Reinigung durch Affinitätschromatographie und Gelfiltration mit Überprüfung durch die

isoelektrische Fokusierungung und Immunopräzipitation studiert. Das Immunglobulin, das in den Eiern der colubriden Schlangen deponiert wird, ist ein einzelner, nicht-gekürzter IgY-Antikörper in einer Konzentration, die der im Serum der Schlange ungefähr gleich ist. Eine leistungsfähige Methode zum Isolieren des Antikörpers aus den Schlangeneiern wurde entwickelt, basierend auf der PEG-Präzipitationstechnik für Vogel - Dotterimmunglobuline; ein einfaches Protokoll für das Isolierungsverfahren für Reptilieneier wird zur Verfügung gestellt.
© Andreas Hassl opus vindobonensis fabricavit AD MMI
mutatio ultima: 06.02.09 VS 17.01